VALORACIÓN DEL PODER PRONÓSTICO DE NUEVOS BIOMARCADORES

EN EL MELANOMA UVEAL 

 

El melanoma uveal (MU) es el tumor primario intraocular más frecuente en la edad adulta, con una incidencia de aproximadamente 7 casos por millón de habitantes y año, y con una mortalidad del 30% a los 5 años años del diagnóstico y tratamiento (Singh et al., 2005). A pesar de los avances que se han llevado a cabo en las últimas décadas, sobre todo en las formas de terapia local, el pronóstico vital de los pacientes con MU no ha cambiado en los últimos 50 años. Estudios epidemiológicos señalan que el MU es más frecuente en edades avanzadas y en caucasianos, especialmente aquellos con ojos de coloración iridiana azul-grisácea; no hay una predominancia de género y el MU es raramente causado por mutaciones genéticas. Su localización más frecuente es en la coroides (90% de los casos), aunque también puede producirse en el cuerpo ciliar (5-10%) y en el iris (3%). Los MU de mejor pronóstico son los situados en el iris y los de peor pronóstico los de cuerpo ciliar. La mayor parte de estos tumores son asintomáticos inicialmente. Con su crecimiento aparecen signos y síntomas oftalmológicos que van desde manchas en el iris a pérdidas importantes de agudeza visual.

 

Aunque el MU y el melanoma cutáneo se originan de un precursor común celular, el melanocito, tienen diferencias importantes en la biología tumoral y en el comportamiento, incluyendo las características moleculares (Iwamoto et al., 2000). A diferencia del melanoma cutáneo, el MU se disemina principalmente por la sangre y sus metástasis se sitúan preferentemente en el tejido hepático. La enfermedad con extensión sistémica es la primera causa de muerte en el MU, y puede aparecer después de un intervalo largo de tiempo, lo cual sugiere la presencia de micrometástasis ocultas en el momento en que el tumor primario se diagnostica y trata (COMS report No18, 2001).

 

La enucleación del globo ocular fue el primer tratamiento estándar aceptado para el MU y actualmente sigue siendo el tratamiento de elección para los tumores de gran tamaño. Sin embargo, han surgido tratamientos conservadores para evitar esta forma de terapia radical. Estos incluyen: braquiterapia con I125, haz de protones, resección transescleral o trans-retiniana, y combinaciones de los anteriores con la termoterapia transpupilar. Actualmente, utilizando cualquiera de las opciones de tratamiento conservador o sus combinaciones, el grado de control local es mayor del 90% después de 5 años. Sin embargo, a pesar de ese éxito, las metástasis ocurren por vía hematógena en más del 50% de los pacientes pasados 15 años (Lorigan et al., 1991). 

 

El Grupo de Tumores Intraoculares del Adulto se ha centrado en la última década en el estudio de factores moleculares asociados con el desarrollo del MU (Pardo et al., 2004; 2005; 2006; 2007; Bande et al., 2012). Primeramente estudiamos proteínas relacionadas con las fases G1/S del ciclo celular en cultivos primarios de MU establecidos a partir de ojos enucleados. Valoramos la proliferación de estas células y la disregulación de las proteínas que controlan el ciclo celular como las ciclinas, cdks e inhibidores de cdks. Además, prestamos especial atención a la proteína antitumoral Rb, la cual no interactuaba con el factor de transcripción E2F en ciertos MU. Descubrimos que la inactivación de Rb producida por la interacción con otras proteínas impedía su efecto antitumoral en el ciclo celular de las células MU cultivadas (Pardo et al., 2004). Después de este estudio decidimos aplicar la nueva tecnología de la Proteómica para estudiar el MU. Ello nos permitió identificar un gran número de nuevas proteínas previamente no relacionadas con el MU por análisis proteómico global y diferencial en las células MU. Nuestro objetivo era identificar marcadores moleculares específicos implicados en el desarrollo y metástasis del MU. Más concretamente, inicialmente analizamos el proteoma de MU a partir de cultivos primarios establecidos. De esta forma pudimos identificar 683 proteínas correspondientes a 393 genes; 18% estaban relacionadas con cáncer, incluyendo aquellas implicadas en la invasión y metástasis (alfa-actina, ezrina, protomyosina, vimentina, MUC-18), división celular y proliferación (CENP-F, Op18, p80), resistencia a fármacos (P-glycoproteina, gp94), oncogenes (DJ-1, EMS1, FUS), etc. La publicación de estos hallazgos constituyó por primera vez la utilización de la Proteómica para el estudio del MU (Pardo et al., 2005). Después del estudio del proteoma, caracterizamos el fenotipo de invasión por análisis proteómico diferencial comparando cultivos con alto y bajo potencial de invasión en ensayos con Matrigel. Este estudio nos mostró que 290 proteínas diferenciaban estos cultivos; la mayor parte de ellas relacionadas con el metabolismo celular, pero también con la adhesión celular y la migración. Hemos publicado la lista de todas estas proteínas centrándonos en la validación de los marcadores de invasión HMG-1 y MUC18 y el oncogén DJ-1. En el caso de DJ-1, no sólo vimos que las células liberan esta proteína al ambiente extracelular, sino que esta proteína podía ser detectada mediante Western blot en el suero de algunos pacientes (Pardo et al., 2006; 2007). En relación con este oncogén, nuestro grupo ha encontrado recientemente que esta proteína podría constituir un biomarcador sanguíneo importante como signo de riesgo de evolución de los nevus a melanomas coroideos, es decir, de la malignización de un tumor benigno (Bande et al., 2012). Así hemos descrito por primera vez cómo los pacientes con nevus coroideos presentaban niveles circulantes significativamente elevados de DJ-1 en los casos con síntomas (signos oftalmológicos), tamaño de nevus mayor de 1.5mm, un diámetro basal mayor de 8mm, y presencia de sombra acústica intra-lesional. 

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